Treatment of subclinical mastitis of cows with probiotics

Abstract

A large number of dairy cows in Ukrainian farms suffer from subclinical mastitis, which leads to significant economic losses in agriculture. Conditioned upon the lack of clinical manifestations it is difficult to detect, in particular, explained by insufficient information about the microbial composition of milk. The ban on the use of antibiotics for productive animals is forcing new safe and effective remedies. The aim of the study was to determine the therapeutic effect of Bacillus megaterium NCH 55 in subclinical mastitis of Holstein cows. Research materials – milk of cows with subclinical mastitis, isolates of microorganisms and B. megaterium NCH 55. Methods used: California test for mastitis; microscopic test to count the total number of somatic cells by the method of Prescott and Britt; bacterial method for the study of microorganisms; polymerase chain reaction to determine Mycoplasma spp. in milk; spectrophotometry; method VI Brillis to determine the adhesive properties of Bacillus megaterium NCH 55; determination of antagonistic properties of B. megaterium by diffusion into agar wells; the method of flow cytometry using the device «SomaCount Flow Cytometer»; physiological. The experiment was conducted in dairy farms of the North-Eastern region of Ukraine: LLC agrofirm «Lan», LLC agrofirm «Vorozhbalatinvest», LLC agrofirm «Vladana» in the period February-August 2021. Isolates of S. aureus, S. agalactiae, E. coli enterohemorrhagic, E. coli, Candida, E. fecalis, S. epidermidis and Mycoplasma spp. were detected in milk samples from cows with subclinical mastitis. Microscopic studies have shown that Bacillus megaterium NCH 55 are white gram-positive rods that have low adhesive properties and form spores. The greatest antagonism of B. megaterium is shown in relation to bacterial isolates in concentration of 1×109, CFU/g. In 70% of cows that reached a productivity of more than 30 kg/day on the 30th day of research, milk parameters such as the number of somatic cells (CSC ≤400 thousand/cm3) and the number of mesophilic aerobic and facultative anaerobic microorganisms (kMAFANM) (≤100 thousand CFU/cm3) corresponded to the class «Extra». The recovery time of animals with subclinical mastitis depended on the degree of damage to the breast and individual characteristics of the organism. Cows that did not reach a productivity of 30 kg/day continued treatment individually. The number of somatic cells in the milk of cows was ≤500 thousand/cm3 and kMAFAnM ≤200 thousand CF/cm3.

Велика кількість дійних корів у господарствах України страждає на субклінічний мастит, що призводить до значних економічних втрат у сільському господарстві. Через відсутність клінічних проявів його складно виявляти, зокрема, і через недостатню інформацію про мікробний склад молока. Заборона на використання антибіотиків для продуктивних тварин примушує до пошуку нових безпечних ефективних засобів. Метою дослідження було визначення лікувального ефекту Bacillus megaterium NCH 55 за субклінічного маститу корів породи голштин. Матеріали дослідження – молоко корів за субклінічного маститу, ізоляти мікроорганізмів та В. megaterium NCH 55. Використані методи: каліфорнійській тест на мастит; мікроскопічний тест для підрахунку загальної кількості соматичних клітин методом Прескотта і Бритта; бактеріальний метод для дослідження мікроорганізмів; полімеразна ланцюгова реакція для визначення Mycoplasma spp. в молоці; спектрофотометрію; методом В. І. Бриліса для визначення адгезивних властивостей Bacillus megaterium NCH 55; визначення антагоністичних властивостей В. megaterium методом дифузії в агарові лунки; метод проточної цитометрії за допомогою приладу «SomaCount Flow Cytome-ter»; фізіологічний. Експеримент проводився у молочних господарствах Північно-східного регіону України: ТОВ агрофірма «Лан», ТОВ агрофірма «Ворожбалатінвест», ТОВ агрофірма «Владана» у період лютий-серпень 2021 року. У зразках молока корів хворих на субклінічну форму маститу були виявлені ізоляти: S. aureus, S. Agalactiae, E. coli ентерогеморагічна, E. coli, Candida, E. fecalis, S. Epidermidis та Mycoplasma spp. Мікроскопічними дослідженнями встановлено, що Bacillus megaterium NCH 55 являють собою білі грампозитивні палички, які мають низькі адгезивні властивості та утворюють спори. Найбільший антогонізм В. megaterium проявляє стосовно бактеріальних ізолятів у концентрації 1×109, КУО/г. У 70 % корів, які на 30 добу досліджень досягли продуктивності більше 30 кг/добу показники молока такі як кількість соматичних клітин (КСК ≤400 тис/см3) та кількість мезофільних аеробних і факультативно-анаеробних мікроорганізмів (кМАФАнМ) (≤100 тис.КУО/см3) відповідали класу «Екстра». Термін одужання тварин хворих на субклінічний мастит залежав від ступеня ураження молочної залози та індивідуальних особливостей організму. Коровам, які не досягли продуктивності 30 кг/добу продовжили лікування в індивідуальному порядку. При цьому у молоці корів кількість соматичних клітин була ≤500 тис/см3 та кМАФАнМ ≤200 тис.КУО/см3.