Застосування біохімічного типування у ветеринарній медицині при ентеробактеріозах бджіл для визначення Klebsiella Pneumoniae

Abstract

В статті висвітлена лабораторна діагностика (in vitro), а саме ідентифікація чистої культури патогенних бактерій бджіл виду Klebsiella Рneumoniae, при виникненні ентеробактеріозів бджіл у зимово-весняний та літньо-осінній періоди. Ціль дослідження полягала у біохімічній типізації методами гуманної медицини бактерій виду Klebsiella Рneumoniae, виділених при дисбактеріозах бджіл, які мають характерний симптомокомплекс зниження сили бджолиних сімей, що своєю чергою призводить до зниження резистентності бджолиної сім'ї їх опоношенням, повзанням, а згодом, роїнням чи смерті. Забрудення рамок та стінок вуликів випорожненнями призводить до різкого погіршення вететеринарно-санітарного стану пасіки та значних економічних збитків для пасічників. Чиста культура патогенних бактерій слугувала об'єктом для експерименту. Попередньо встановлено родинну належність бактерій – Enterobacteriaceae, що було підтверджено «Житомирською регіональною державною лабораторією Державної служби України з питань безпечності харчових продуктів та захисту споживачів». Лабораторна діагностика дисбіозів бджіл, викликаних ентеробактеріями, проведена у такій послідовності: 1. Висів патологічного матеріалу, відібраного від хворих бджіл, на елективні поживні середовища для ентеробактерій та виділення чистої культури; 2. Мікроскопія типових колоній; 3. Визначення родової належності; 4. Визначення рухової активності бактерій: 5. Тест на уреазу; 6. Тест на індол; 7. Фенілаланіновий тест; 8. Дослідження основних ферментативних властивостей бактерій. За серією лабораторних біохімічних дослідженнь чистої культури мікроорганізмів, виділеної із змішаної культури від хворих на ентеробактеріози бджіл, ізольований штам належить до родини Enterobacteriaceae, роду Klebsiella та виду Klebsiella pneumoniae. Новизна застосування алгоритму визначення видової належності ентеробактерій бджіл виду Klebsiella pneumoniae дозволяє чітко та економічно доцільно діагностувати дисбактеріози у зимово-весняний та літньо-осінній періоди. Виділені бактерії виду Klebsiella pneumoniae слугують експериментальними культурами для проведення випробування препаратів різних напрямів та дій в лабораторних умовах та зберігаються на кафедрі мікробіології, фармакології та епізоотології Поліського національного університету (раніше Житомирський національний агроекологічний університет). Подальше застосування комплексної діагностики ентеробактеріозів бджіл, включаючи методи біохімічної типізації, дозволить розширити етіологічні фактори виникнення колапсу бджолних сімей.

The article presents laboratory diagnostics (in vitro), namely, identification of pure culture of pathogenic bacteria of Klebsiella Pneumoniae species in case of enterobacteriosis in bees in winter-spring and summer-autumn times. The purpose of the study was the biochemical typification of bacteria of the species Klebsiella Pneumoniae with humane medicine methods, that isolated in the case of dysbacteriosis of bees which have a characteristic symptomatic complex of a decrease in the strength of bee families, which leads to a decrease in the resistance of the bee family, their diarrhea, crawling, and then swarming or death of bees. Contamination of beehive frames and walls of beehive by fecation leads to sharp deterioration of the apiary's veterinary and sanitary condition and significant economic damage for beekeepers. Pure culture of pathogenic bacteria served as an object for experiment. The Family of the bacteria was established earlier – Enterobacteriaceae, and was confirmed by «Zhytomyr Regional State Laboratory of the State Service of Ukraine for Food Safety and Consumer Protection». Laboratory diagnostics of dysbiosis in bees caused by enterobacteria was performed in such a sequence: 1. Sowing of pathological material taken from sick bees on selective nutrient media for enterobacteria and extraction of pure culture; 2. Microscopy of typical colonies; 3. Determination of bacteria genus; 4. Determination of bacteria motor activity: 5. Urease test; 6. Indole test; 7. Phenyalaalanine test; 8. Study of basic enzymatic properties of bacteria. In a series of laboratory biochemical studies of pure culture microorganisms isolated from mixed culture from diseased bees the isolated bacterial strain belongs to the Family Enterobacteriaceae, Genus Klebsiella, Species Klebsiella pneumoniae. The novelty of the application of the algorithm for determining the species of Klebsiella pneumoniae enterobacteriae allows to diagnose dysbacterioses in winter-spring and summer-autumn times clearly and economically. The isolated Klebsiella pneumoniae bacteria serve as experimental cultures for testing drugs of various directions and actions in laboratory conditions and are kept at the Department of Microbiology, Pharmacology and Epizootology, Faculty of Veterinary Medicine of Polissya National University (formerly Zhytomyr National Agroecological University). Further application of complex diagnostics of enterobacteriosis of bees, including methods of biochemical typification, will allow to expand etiological factors of bee family collapse.